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GC試劑盒實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題解答
日期:2024-09-17 03:30
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摘要:
(GC)檢測(cè)試劑盒原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
GC試劑盒實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題解答:
一、洗板
也許因素:1) 選用手藝洗板,孔與孔之間液體穿插。 2) 選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,致使洗板不完全;洗板針阻塞,抽吸不完全;洗板不暢,致使洗板作用差。 3) 反響板過(guò)多形成洗板等待時(shí)刻長(zhǎng)。
解決辦法:1) 確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無(wú)或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
二、顯色
ELISA試劑盒也許因素:1) 顯色劑制造后放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)或運(yùn)用過(guò)期顯色劑; 2) 加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。
解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前制造,堅(jiān)持不必過(guò)期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必; 2) 加樣時(shí)堅(jiān)持顯色劑不外流; 3) A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
三、停止
也許因素如加停止液時(shí)發(fā)生較多氣泡,致使假陽(yáng)性添加。所以在加停止液時(shí)應(yīng)防止發(fā)生氣泡。
四、讀板
ELISA試劑盒如讀板時(shí)板底不清洗等。應(yīng)確保酶標(biāo)板清洗。所以在全部操作過(guò)程中確保酶標(biāo)板不觸摸次氯酸; 盡也許完成ELISA檢查規(guī)范自動(dòng)化,有用進(jìn)步檢查質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了挑選優(yōu)良試劑外,有必要嚴(yán)厲依照操作過(guò)程進(jìn)行操作,一起作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以謹(jǐn)慎的工作作風(fēng)檢查每一份標(biāo)本,才干確保檢查質(zhì)量。ELISA試劑盒如今國(guó)內(nèi)已有適當(dāng)數(shù)量的單位具有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這關(guān)于完成ELISA規(guī)范化檢查、進(jìn)步檢查質(zhì)量起到了重要作用。
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